Home
1-luan-an-thac-si
khoa-hoc-tu-nhien-thac-si
Nghiên cứu sử dụng gen Coda làm chỉ thị chọn lọc tạo vector chuyển gen mang tính an toàn sinh học
[giaban]0.000 VNĐ[/giaban]
[kythuat]
[/kythuat]
[tomtat]
[tomtat]
Nghiên
cứu sử dụng gen Coda làm chỉ thị chọn lọc tạo vector chuyển gen mang tính an
toàn sinh học
MỤC
LỤC
MỞ
ĐẦU
CHƯƠNG
I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1.
Ảnh hưởng của một số điều kiện bất lợi của môi trường tới thực vật
1.1.1.
Sự ảnh hưởng của nhiệt độ cao đến thực vật
1.1.2.
Sự ảnh hưởng của hạn hán tới thực vật
1.1.3.
Sự ảnh hưởng của đất nhiễm mặn tới thực vật
1.2.
Cơ chế chống chịu của thực vật với các điều kiện bất lợi của môi trường
1.2.1.
Hệ thống vetor liên hợp
1.2.2.
Vetor nhị thể
1.3.
Các gen sử dụng trong chọn lọc và chỉ thị
1.3.1.
Gen kháng kháng sinh
1.3.2.
Gen kháng chất diệt cỏ
1.3.3.Gen
chọn lọc mannose
1.3.4.Các
gen chỉ thị: GFP (green fluorescene protein), GUS (β-1,4-glucuronidase)
1.4.
1.4. Tổng quan nghiên cứu về vector chuyển gen mang tính an toàn sinh học
1.4.1.
Sự cần thiết nghiên cứu vector chuyển gen mang tính an toàn sinh học
1.4.2.
Các gen/hệ thống chọn lọc thân thiện
1.4.3.
Sự loại bỏ các gen chỉ thị chọn lọc từ cây chuyển gen
1.5.Cơ
sở khoa học trong sử dụng gen codA làm chỉ thị chọn lọc ở thực vật chuyển gen
1.5.1.
Giới thiệu về gen codA
1.5.2.
Các nghiên cứu chuyển gen codA nhằm tăng cường khả năng chống chịu ở thực vật
CHƯƠNG
II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1.
Vật liệu nghiên cứu
2.1.1.
Vật liệu thực vật
2.1.2.
Các chủng vi khuẩn, vector và cặp mồi sử dụng
2.1.3.
Hóa chất, thiết bị
2.1.3.1.
Hóa chất
2.1.3.2.
Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm.
2.2.
Phương pháp nghiên cứu
2.2.1.
Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction)
2.2.2.
Phương pháp điện di DNA trên gel agarose
2.2.3.
Phương pháp tinh sạch DNA từ gel agarose
2.2.4.
Phương pháp xử lý ADN bằng enzyme hạn chế.
2.2.5.
Phản ứng nối ghép gen
2.2.6.
Phương pháp biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào khả biến E.coli
2.2.7.
Phương pháp tách chiết plasmid tái tổ hợp
2.2.8.
Phương pháp biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào khả biến A.tumefaciens
C58/PGV2260 bằng xung điện
2.2.9.
Phương pháp tạo cây thuốc lá chuyển gen
2.2.10.
Kiểm tra sự biểu hiện của gen chuyển ở mức độ phiên mã bằng kỹ thuật RT-PCR
2.2.11.
Đánh giá khả năng chịu nhiệt của các dòng thuốc lá K326 chuyển gen codA
2.2.12.
Sàng lọc khả năng chịu mặn của dòng thuốc lá chuyển gen in vitro
2.2.13.
Phương pháp tính toán và xử lý số liệu
CHƯƠNG
III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1.
Thiết kế vector chuyển gen pCAMBIA1301/HSP-codA mang gen codA
3.1.1.
Thiết kế vector chuyển gen pCAMBIA1301/35S-codA mang gen codA hoạt động dưới sự
điều khiển của promoter cơ định 35S
3.1.2.Thiết
kế vector pCAMBIA1301/HSP-codA mang gen codA hoạt động dưới sự điều khiển của
promoter HSP 18.2
3.1.3.Loại
bỏ gen chọn lọc hptII mã hóa cho hygromycin phosphotransferase khỏi vector
pCAMBIA1301/HSP-codA
3.1.4.Tạo
chủng Agrobacterium tumefaciens mang vector chuyển gen
3.2
. Kết quả chuyển gen codA vào cây thuốc lá K326
3.2.1.Chuyển
cấu trúc pCAMBIA1301/HSP-codA vào cây thuốc lá thông qua vi khuẩn A.
tumefaciens
3.2.2.Sàng
lọc khả năng chịu nhiệt của dòng thuốc lá chuyển gen trong in vitro
3.2.3.Phân
tích các dòng cây chuyển gen bằng kỹ thuật PCR
3.2.4.
Sàng lọc khả năng chịu mặn của dòng thuốc lá chuyển gen trong in vitro
3.2.5.
Phân tích cây thuốc lá chuyển gen codA bằng kỹ thuật RT-PCR
KẾT
LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
TÀI
LIỆU THAM KHẢO
Bài viết liên quan